Инъекция сперматозоида в цитоплазму яйцеклетки (Intracytoplasmic sperm injection - ICSI)
ICSI - это введение единичного сперматозоида в цитоплазму ооцита. Эта процедура производится на инвертированном микроскопе, на котором установлены подогревающий столик ( t 37°) , специальная оптика (Нoffman) и гидравлические манипуляторы (Narishige).
Какие показания для этой процедуры?
Неприемлемый эякулят для стандартной процедуры ЭКО (менее 5 млн. сперматозоидов, менее 2% морфологически нормальных сперматозоидов).
Анализ эякулята приемлемый для ЭКО, но уменьшено выживание сперматозоидов и уменьшено их количество с поступательными движениями.
В предыдущем цикле неудачное оплодотворение после стандарного цикла ЭКО оплодотворилось менее 20% аспирированных ооцитов).
Пациенты с ретроградной эякуляцией.
Реинсеминация неоплодотворенных ооцитов после стандартной процедуры ЭКО.
Как это делается?
Обездвиживают сперматозоид путем "придавливания" пипеткой его хвоста и аспирируют внутрь инъекционной пипетки.
Зрелый ооцит фиксируют удерживающей пипеткой.
Прокалывают зону пеллюцида яйцеклетки и инъекционную пипетку вводят в цитоплазму ооцита.
Сперматозоид инъецируют в цитоплазму яйцеклетки и инъекционную пипетку осторожно выводят из ооцита.
Через 16-18 часов ооциты проверяют на наличие пронуклеусов и в случае нормального оплодотворения продолжают дальнейшее их культивирование, как и при стандартной процедуре ЭКО.
Спермограмма По критериям ВОЗ спермограмма фертильных мужчин имеет следующие показатели:
Объем 2 мл и более.
Количество сперматозоидов в 1 мл - 20 млн и более.
Подвижность - 50% и более.
Нормальная морфология - 50% и более.
Чтобы получить наибольшую информацию про качество эякулята мужчина должен знать следующее:
Эякулят получают при помощи мастурбации.
Анализ проводится после 3-х дневного полового воздержания, но не более 7 дней.
Если показатели спермограммы высокие, то можно ограничиться одним анализом. При наличии патологических изменений в эякуляте требуется 2-х, 3-х кратный анализ с интервалом в неделю.
Эякулят собирается в условиях лаборатории, в специальной комнате в одноразовую посуду.
В особых случаях эякулят собирают дома. При этом его необходимо доставить в лабораторию не позже 30 минут. Оптимальной температурой для того, чтобы не погибли сперматозоиды, является 20-37°С.
Нельзя использовать презерватив, потому что он покрыт специальным составом, который за 15-20 минут делает сперматозоиды неподвижными.
Перед использованием и сбором эякулята для проведения процедуры ЭКО не следует несколько дней употреблять алкоголь, курить, посещать баню и сауну.
Ко-культивирование Это культивирование эмбрионов в среде материнского происхождения, которая присутствует в условиях in VIVO.
Для чего это нужно?
Синтетические среды являются субоптимальными для развития и выживаемости эмбрионов in VITRO.
Монослой клеток создает те же условия, которые окружают эмбрион в матке и трубах in VIVO
Монослой клеток секретирует эмбриотрофические факторы, способствующие улучшению развития эмбрионов и увеличивает процент формирования бластоцист, а также частоту имплантации после переноса эмбрионов в полость матки.
Как это делается?
Используется только гомологический материал.
После аспирации фолликулов и переноса ооцитов в питательную среду, производят посев клеток гранулезы в специальные чашки.
Через 18 часов оценивают состояние монослоя, который образовался после прикрепления клеток гранулезы на дне чашки и меняют питательную среду.
После этого через 5-6 часов оплодотворенные ооциты помещают в ко-культуру гранулезных клеток.
Культивирование производится в течение 72 часов, иногда до 5 суток
Перенос эмбрионов производится при помощи специального катетера [ Вверх ]
